1、適用范圍和原理

本實驗方法是將植入物插入試驗動物肌肉內(nèi)，對試驗樣品植入物與對照樣品植入物的生物學反應進行比較，用于評估肌肉組織對植入材料的生物學反應。對照材料是已確立臨床可接受性和生物相容性的醫(yī)療器械所采用的醫(yī)療器械所采用的材料。

2、試驗依據(jù)標準

國內(nèi)：GB/T 16886.6 醫(yī)療器械生物學評價 第6部分：植入后局部反應試驗；

國外：ISO 10993-6 Biological evaluation of medical devices—Part 6: Tests for local effects after implantation。

3、樣品制備

試驗和對照樣品的常規(guī)制備按3.1的規(guī)定，植入物尺寸根據(jù)選用的肌肉群的大小來確定。采用家兔脊柱旁肌試驗時，采用寬1~3mm、長大約10mm的植入物。樣品應制成圓形邊緣，兩端為光滑球面。或者可手術(shù)植入直徑10mm、厚度3mm的較大樣品。樣品應制成圓形邊緣，兩端鈍角修圓。

4、對照樣品的選擇

對照樣品可以為上市對照，也可以依據(jù)GB/T 16886.12 附錄A 選擇陰性對照材料，如PE, 硅樹脂、氧化鋁、不銹鋼。

5、實驗動物和植入部位

將植入物植入家兔或其他動物的肌肉組織時，植入部位的大小應滿足植入物的要求。每次試驗只能使用一種動物，兔脊柱旁肌為首選植入部位，較小的樣品也可選用大鼠臀肌或家兔股肌。

6、實驗動物使用數(shù)量

每一植入期至少采用3只動物，在充足的植入部位植入10個試驗樣品和10個對照樣品。用于評價的試驗和對照樣品本應至少來自3只不同的動物。

如需要對照材料產(chǎn)生的反應大于最小反應時，可在試驗材料的對側(cè)部位植入另外的已知能引起最小組織反應的對照材料。

7、植入步驟

采用家兔脊柱旁肌時，將4個或3個試驗材料樣品植入每只家兔脊柱一側(cè)肌內(nèi)，應平行于脊柱，離中線25~50mm,各植入物間隔約25mm，同法在脊柱另一側(cè)植入4個或3個對照材料樣品。

8、植入周期

應根據(jù)臨床可能接觸時間，或是持續(xù)至相應生物學反應達到或超過某一穩(wěn)定狀態(tài)的時間，來確定試驗周期，所選擇的時間點應進行說明和論證。確保生物學組織反應達到穩(wěn)定狀態(tài)。短期一般選擇1周和4周。長期一般選擇13周和26周。 表1為標準推薦的長期植入觀察期選擇。

表1. 皮下組織、肌肉、骨長期植入試驗觀察期選擇

9、取樣和病理切片制作

到試驗終點時，安樂處死動物后，解剖取樣。制作病理切片，HE染色。

10 、生物學反應評價

通過記錄不同時間點觀察到的肉眼和組織病理學反應來評價生物學反應。將試驗樣品、對照樣品或假手術(shù)部位的反應進行比較。依據(jù)GB/T 16886.6 附錄E進行植入后局部生物學反應評分。與上市對照或者音信對照比較，依據(jù)下表判定器械的組織反應。

表6. 組織病理學結(jié)果判定